El método para preparar un medio en polvo seco en líquido es aproximadamente el mismo y los pasos generales son los siguientes:
Preparar materiales:
Asegúrese de tener suficiente agua pura para cultivo celular o para inyección, así como los aditivos necesarios, como una solución de bicarbonato de sodio al 7,5 %, una solución de L-glutamina 200 mM, una solución de ácido clorhídrico 1 N y una solución de hidróxido de sodio 1 N.
Polvo seco disuelto:
Vierta el medio en polvo seco en un recipiente.
Utilice una cantidad adecuada de agua (normalmente agua pura para cultivo celular o agua pura para inyección) para disolver completamente el polvo seco.
Asegúrese de que la cantidad total de agua sea 2/3 de la cantidad total de medio líquido requerido.
Ajustar el valor del pH:
Utilice un medidor de pH o una tira reactiva de precisión de pH para ajustar el pH del medio al nivel deseado, generalmente 7,2-7,4.
Añadir aditivos:
De acuerdo con las instrucciones del producto y los requisitos experimentales, agregue la cantidad adecuada de bicarbonato de sodio, L-glutamina y otros aditivos.
Filtración para eliminación de bacterias:
La membrana de filtro microporosa de 0,22 µm se utilizó para filtrar y eliminar bacterias para garantizar la esterilidad del medio.
Ahorrar:
El medio líquido preparado se almacenó protegido de la luz a entre 2 ℃ y 8 ℃.
.
Tenga en cuenta:
1. La proporción específica y los pasos de preparación pueden variar según las diferentes marcas y tipos de medios en polvo seco, por lo que se deben leer atentamente las instrucciones en la bolsa de embalaje del medio antes de su uso.
2. Se debe realizar una prueba estéril después de la preparación del medio de cultivo para detectar si hay contaminación en el medio de cultivo.
3. La cantidad de líquido preparado en cada lote debe usarse durante aproximadamente 2 semanas, para evitar la pérdida de nutrientes causada por demasiado tiempo.